ಡಿ. ಯು. ರಿಯಾಜಾಂತ್ಸೆವ್, ಇ. ಎಮ್. ಚುಡಿನೋವಾ, ಎಲ್. ಯು. ಕೊಕೈವಾ, ಎಸ್. ಎನ್.
ಫೈಟೊಪಾಥೋಜೆನಿಕ್ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳು ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊಗಳಲ್ಲಿ ಆಂಥ್ರಾಕ್ನೋಸ್ ಮತ್ತು ಟ್ಯೂಬರ್ ಬ್ಲ್ಯಾಕ್ ಸ್ಪಾಟ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಅಪಾಯಕಾರಿ ಕಾಯಿಲೆಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ. ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಂದ, ಇತರ ಸೂಕ್ಷ್ಮಾಣುಜೀವಿಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಕಾಯಿಲೆಗಳಿಂದ ಅವುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ; ಹಸಿರು ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣುಗಳ ಮೇಲೆ, ರೋಗವು ಲಕ್ಷಣರಹಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಮಾಗಿದ ಕೆಂಪು ಹಣ್ಣುಗಳ ಮೇಲೆ ಮಾತ್ರ ಪ್ರಕಟವಾಗುತ್ತದೆ. ರೋಗಕಾರಕದ ತ್ವರಿತ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾದ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ, ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪಿಸಿಆರ್ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ನೀಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲು, ರಷ್ಯಾದ ವಿವಿಧ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿನ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲ್ಪಟ್ಟ 45 ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ತಳಿಗಳ ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ ಜೀನ್ನ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು.
ಜೆನ್ಬ್ಯಾಂಕ್ ದತ್ತಸಂಚಯದಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ ಇತರ ಜಾತಿಗಳ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಅನುಕ್ರಮಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಜಾತಿ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ತನಿಖೆಯನ್ನು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ರಚಿಸಲಾದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು, ಟೊಮೆಟೊ ಮತ್ತು ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಸಸ್ಯಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ 15 ವಿವಿಧ ಜಾತಿಯ ಪರಾವಲಂಬಿ ಮತ್ತು ಸಪ್ರೊಟ್ರೊಫಿಕ್ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಡಿಎನ್ಎಯೊಂದಿಗೆ ಪಿಸಿಆರ್ ಅನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ಫ್ಯುಸಾರಿಯಮ್ ಆಕ್ಸಿಸ್ಪೊರಮ್, ಎಫ್. ವರ್ಟಿಸಿಲಿಯಮ್, ಫೋಮೋಪ್ಸಿಸ್ ಫಾಸೋಲಿ, ಆಲ್ಟರ್ನೇರಿಯಾ ಆಲ್ಟರ್ನೇಟಾ, ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿ, ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಕಮ್ ಫೆಲಿನಸ್ ಫೆರುಜಿನೋವೆಲುಟಿನಸ್, ಸ್ಟೆಂಫಿಲಿಯಮ್ ವೆಸಿಕೇರಿಯಮ್, ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೋರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿ, ಫೋಮೋಪ್ಸಿಸ್ ಫಾಸೋಲಿ, ನಿಯೋನೆಕ್ಟ್ರಿಯಾ ರಾಡಿಕೋಲಾ, ರೈಜೋಕ್ಟೊನಿಯಾ ಸೋಲಾನಿ, ಪೆನಿಸಿಲಿಯಮ್ ಎಸ್ಪಿ., ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಫುಲ್ವಮ್, ಸಿ. ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯೊಯಿಡ್ಸ್). ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು 20–27ರ ಮಿತಿ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು, ಆದರೆ ಇತರ ಪ್ರಭೇದಗಳನ್ನು 40 ಚಕ್ರಗಳ ನಂತರ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು ಅಥವಾ ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ. ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು 0.01 ಎನ್ಜಿ / ಎಂಎಂ 3 ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಹೊಂದಿದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ಶಿಲೀಂಧ್ರ ರೋಗಗಳ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ರೋಗದ ಬಾಹ್ಯ ಲಕ್ಷಣಗಳಿಲ್ಲದೆ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರದೇಶದ ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಿಂದ, ಗೆಡ್ಡೆಗಳು - ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ, ಮಾಸ್ಕೋ, ಕಲುಗಾ, ನಿಜ್ನಿ ನವ್ಗೊರೊಡ್ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿನ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಿಂದ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಸೋಂಕಿನ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಎಲೆಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊಂದಿರುವ ಒಂದು ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆ ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರಾಂತ್ಯದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ; ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ, ಮಾಸ್ಕೋ, ಕಲುಗಾ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆದ 5 ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಈ ರೋಗಕಾರಕದ ಡಿಎನ್ಎ ಗಮನಾರ್ಹ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು.
ಪರಿಚಯ
ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕುಲದ ಅಣಬೆಗಳು ಧಾನ್ಯಗಳು, ತರಕಾರಿಗಳು, ಗಿಡಮೂಲಿಕೆಗಳು, ದೀರ್ಘಕಾಲಿಕ ಹಣ್ಣು ಮತ್ತು ಬೆರ್ರಿ ಸಸ್ಯಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಅಪಾಯಕಾರಿ ಫೈಟೊಪಾಥೋಜೆನ್ಗಳಾಗಿವೆ. ಈ ಕುಲದ ಸರ್ವತ್ರ ಜಾತಿಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾದ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಸ್ (ವಾಲ್ರ್).
ಹ್ಯೂಸ್, ಆಂಥ್ರಾಕ್ನೋಸ್ ಮತ್ತು ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊಗಳ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಏಜೆಂಟ್, ಮತ್ತು ಸೋಲಾನೇಶಿಯ ಕುಟುಂಬದ ಹಲವಾರು ಸಸ್ಯಗಳ ಕಾಯಿಲೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಕಳೆಗಳು (ಡಿಲ್ಲಾರ್ಡ್, 1992). ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು ಸಸ್ಯ, ಕಾಂಡದ ನೆಲೆಗಳು, ಎಲೆಗಳು ಮತ್ತು ಹಣ್ಣುಗಳ ಎಲ್ಲಾ ಭೂಗತ ಭಾಗಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತವೆ (ಆಂಡ್ರೈವನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1998; ಜಾನ್ಸನ್, 1994). ಸೋಂಕಿತ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ಸಿಪ್ಪೆಯ ಮೇಲೆ, ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಉಚ್ಚರಿಸಲಾದ ಅಂಚುಗಳೊಂದಿಗೆ ಬೂದು ಕಲೆಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಬಹುದು, ಅದರ ಮೇಲೆ ಸ್ಪೋರ್ಯುಲೇಷನ್ ಮತ್ತು ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕ್ಲೆರೋಟಿಯಾದ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆಗಳು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಗೋಚರಿಸುತ್ತವೆ. ಶೇಖರಣಾ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ತಿರುಳಿನಲ್ಲಿ ಮೃದುವಾದ ವಿಷಯಗಳೊಂದಿಗಿನ ಹುಣ್ಣುಗಳು ರೂಪುಗೊಳ್ಳಬಹುದು, ಅಂದರೆ. ಈ ರೋಗವು ಆಂಥ್ರಾಕ್ನೋಸ್ ಹಂತವನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸುತ್ತದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ಇದು ಅತ್ಯಂತ ಅಪರೂಪ.
ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣುಗಳಲ್ಲಿ ಆಂಥ್ರಾಕ್ನೋಸ್ (ಸಣ್ಣ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಚರ್ಮದ ಹುಣ್ಣುಗಳು) ಲಕ್ಷಣಗಳು ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿವೆ. ಎಲೆಗಳ ಮೇಲೆ, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ಲಕ್ಷಣಗಳು ಗಾ brown ಕಂದು ಬಣ್ಣದ ಕಲೆಗಳಾಗಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ, ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹಳದಿ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಗಡಿಯಾಗಿರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಜಾನ್ಸನ್, 1994).
ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ಮೇಲೆ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆ ಬೆಳವಣಿಗೆಯು ಅವುಗಳ ನೋಟವನ್ನು ಹಾಳು ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ತೊಳೆದ ಕೆಂಪು-ಸಿಪ್ಪೆ ಆಲೂಗಡ್ಡೆಗಳನ್ನು ಮಾರಾಟ ಮಾಡುವಾಗ ಉಚ್ಚರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಿಪ್ಪೆಯ ಹೊರಹರಿವು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಆವಿಯಾಗುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿದ ಶೇಖರಣಾ ನಷ್ಟಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಹಸಿವು ಮತ್ತು ಮ್ಯಾಕ್ಇಂಟೈರ್, 1979). ಇತರ ಸಸ್ಯ ಅಂಗಗಳಿಗೆ ಹಾನಿಯು ಇಳುವರಿ ನಷ್ಟಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ತೆರೆದ ಮತ್ತು ಮುಚ್ಚಿದ ನೆಲದಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ (ಜಾನ್ಸನ್, 1994; ಟ್ಸರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999). ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ರೋಗಗಳು ರಷ್ಯಾ ಸೇರಿದಂತೆ ವಿಶ್ವದ ಬಹುತೇಕ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿದೆ (ಲೀಸಾ, ಹಿಲ್ಟನ್, 2003; ಬೆಲೋವ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2018). ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಶಿಲೀಂಧ್ರನಾಶಕಗಳ ಸಾಕಷ್ಟು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವ ಮತ್ತು ನಿರೋಧಕ ಪ್ರಭೇದಗಳ ಕೊರತೆಯಿಂದಾಗಿ ಈ ರೋಗಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣ ಕಷ್ಟಕರವಾಗಿದೆ (ಓದಿ, ಮರೆಮಾಡಿ, 1995).
ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಇನಾಕ್ಯುಲಮ್ ಬೀಜದ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ (ಓದಿ, ಮರೆಮಾಡಿ, 1988; ಜಾನ್ಸನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1997), ಟೊಮೆಟೊ ಬೀಜಗಳು (ಬೆನ್-ಡೇನಿಯಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2010), ಸಸ್ಯ ಭಗ್ನಾವಶೇಷಗಳ ಮೇಲೆ ಮಣ್ಣಿನಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲ ಬದುಕಬಲ್ಲವು (ಡಿಲ್ಲಾರ್ಡ್, 1990 ; ಡಿಲ್ಲಾರ್ಡ್, ಕಾಬ್, 1993) ಮತ್ತು ಕಳೆಗಳಲ್ಲಿ (ರೈಡ್, ಪೆನ್ನಿಪ್ಯಾಕರ್, 1987). ಹಲವಾರು ಲೇಖಕರ ಕೃತಿಗಳು (ಓದಿ, ಮರೆಮಾಡಿ, 1988; ಬಾರ್ಕ್ಡಾಲ್, ಡೇವಿಸ್, 1992; ಜಾನ್ಸನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1997; ಡಿಲ್ಲಾರ್ಡ್, ಕಾಬ್, 1993) ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊಗಳಲ್ಲಿನ ರೋಗದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬೀಜ ಮತ್ತು ಇನಾಕ್ಯುಲಮ್ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಮಣ್ಣು. ಆದ್ದರಿಂದ, ರೋಗದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ನಷ್ಟವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು, ಬೀಜ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳಲ್ಲಿ, ಮಣ್ಣಿನಲ್ಲಿ, ಬೀಜ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳು ಮತ್ತು ಶೇಖರಣೆಗಾಗಿ ಹಾಕಿದ ಟೊಮೆಟೊ ಬೀಜಗಳಲ್ಲಿ ಶಿಲೀಂಧ್ರದ ಹರಡುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸುವುದು (ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸೇರಿದಂತೆ) ಅಗತ್ಯ. ಮಣ್ಣು ಮತ್ತು ಸಸ್ಯ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳಲ್ಲಿನ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ರೋಗನಿರ್ಣಯವನ್ನು ಮೈಕ್ರೊಸ್ಕ್ಲೆರೋಟಿಯ ಇರುವಿಕೆಯಿಂದ ಮಾತ್ರ ಕೈಗೊಳ್ಳಬಹುದು, ಆದಾಗ್ಯೂ, ಇತರ ರೀತಿಯ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳಲ್ಲಿಯೂ ಇದು ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ.
ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿನ ರೋಗಲಕ್ಷಣಗಳು ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿ ಎಂಬ ಶಿಲೀಂಧ್ರದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಬೆಳ್ಳಿಯ ಹುರುಪನ್ನು ಹೋಲುತ್ತವೆ. ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿಯನ್ನು ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವುದು ಕಷ್ಟಕರವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪೌಷ್ಠಿಕಾಂಶದ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಬೆಳೆಯುವುದರಿಂದ ಬಹಳ ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲು, ವಾದ್ಯಗಳ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ. ಅತ್ಯಂತ ಅನುಕೂಲಕರ ವಿಧಾನವೆಂದರೆ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (ಪಿಸಿಆರ್) ಮತ್ತು ಅದರ ಮಾರ್ಪಾಡು - ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪಿಸಿಆರ್. ಪ್ರಸ್ತುತ, ಆರ್ಡಿಎನ್ಎದ ಐಟಿಎಸ್ 2002 ಪ್ರದೇಶಕ್ಕಾಗಿ ಬ್ರಿಟಿಷ್ ಸಂಶೋಧಕರು (ಕಲ್ಲೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1) ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಯುರೋಪ್ ಮತ್ತು ಯುನೈಟೆಡ್ ಸ್ಟೇಟ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಬಳಕೆಯು ರಷ್ಯಾದ ಐಸೊಲೇಟ್ಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ (ಬೆಲೋವ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2018). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯತ್ಯಾಸಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಒಂದೇ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮದಿಂದ ಅದನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದು ತಪ್ಪು ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಹೆಚ್ಚು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ, ಹಲವಾರು ಜಾತಿ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಅಗತ್ಯವಿದೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ನಾವು ಮೂಲ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಗ್ಲೈಸೆರಾಲ್ಡಿಹೈಡ್ -3-ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ ಜೀನ್ನ ಅನುಕ್ರಮದಿಂದ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ.
ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು
ರಚಿಸಿದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು, ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಗಳು ಮತ್ತು ಹಣ್ಣುಗಳು, ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳು (ಟೇಬಲ್ 15) ನ ರೋಗಪೀಡಿತ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ಲೇಖಕರು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿರುವ 1 ಜಾತಿಯ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ನಾವು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗಾಗಿ, ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಸೋಂಕಿನ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸಸ್ಯಗಳ ಅಂಗಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ, ಪ್ರತಿ ಬುಷ್ಗೆ ಒಂದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಅಂಗಗಳಿಲ್ಲ.
ಒಂದು ಸಿಪ್ಪೆಯ ತುಂಡು, ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣಿನ ತುಂಡು, ಮತ್ತು ಪೀಡಿತ ಎಲೆಯನ್ನು ಬೈನಾಕ್ಯುಲರ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು, ನಂತರ ಕವಕಜಾಲ, ಬೀಜಕಗಳನ್ನು ಅಥವಾ ಅಂಗಾಂಶದ ತುಂಡನ್ನು ಪೆಟ್ರಿ ಭಕ್ಷ್ಯದಲ್ಲಿ ಅಗರ್ ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ (ವರ್ಟ್ ಅಗರ್) ತೀಕ್ಷ್ಣವಾದ ect ೇದಿಸುವ ಸೂಜಿಯೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು. ಐಸೊಲೇಟ್ಗಳನ್ನು ಅಗರ್ ಓರೆಯಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳಲ್ಲಿ 4 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ ತಕ್ಷಣ (ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ) 70% ಈಥೈಲ್ ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್ನಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಉದ್ದೇಶಿಸಿರುವ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ರೋಗಗಳ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಗಳ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳನ್ನು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಕ್ಕೆ ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು, ಅವುಗಳಿಂದ ಸಿಪ್ಪೆ ಸುಲಿದ (2 × 1 ಸೆಂ ತುಂಡು), ಮತ್ತು –20 at at ನಲ್ಲಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗುವವರೆಗೆ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗಾಗಿ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ದ್ರವ ಬಟಾಣಿ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. ಶಿಲೀಂಧ್ರದ ಕವಕಜಾಲವನ್ನು ದ್ರವ ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ತೆಗೆದು, ಫಿಲ್ಟರ್ ಕಾಗದದಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸಿ, ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿ, ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಿ, ಸಿಟಿಎಬಿ ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು, ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ನಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಯಿತು, ಐಸೊಪ್ರೊಪನಾಲ್ ಮತ್ತು 0.5 ಎಂ ಪೊಟ್ಯಾಸಿಯಮ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಮಿಶ್ರಣದಿಂದ 2% ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್ನಿಂದ ಎರಡು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಡಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ –70 С at (ಕುಟುಜೋವಾ ಮತ್ತು ಇತರರು, 20) ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕ್ಯುಬಿಟ್ 2017 (ಕಿಯಾಜೆನ್, ಜರ್ಮನಿ) ನಲ್ಲಿ ಡಬಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಗಾಗಿ ಎಚ್ಎಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣ ಕಿಟ್ ಬಳಸಿ ಡಿಎನ್ಎ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆಲ್ಕೊಹಾಲ್ಯುಕ್ತ ಮತ್ತು ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಚುರೇಟೆಡ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು, ನಂತರ ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ಶುದ್ಧ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ಕವಕಜಾಲಕ್ಕಾಗಿ).
ಕೋಷ್ಟಕ 1. ಬಳಸಿದ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ತಳಿಗಳ ಮೂಲ
ಅಣಬೆ ಹೆಸರು | ಸಸ್ಯ, ಅಂಗ | ಆಯ್ಕೆಯ ಸ್ಥಳ |
---|---|---|
ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಸ್ 1, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ 2, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ 3, ಇಲಿಯೊನೆಕ್ಟ್ರಿಯಾ ಕ್ರಾಸ್ಸಾ, ರೈಜೋಕ್ಟೊನಿಯಾ ಸೋಲಾನಿ | ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಟ್ಯೂಬರ್ | ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ ಪ್ರದೇಶ, 1 ನೇ ಕ್ಷೇತ್ರ ಪೀಳಿಗೆಯ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳು, ತಳಿ ಕೆಂಪು ಸ್ಕಾರ್ಲೆಟ್ |
ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳು 4 | ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಎಲೆ | ಪ್ರತಿನಿಧಿ. ಮಾರಿ ಎಲ್, ಯೋಶ್ಕರ್-ಓಲಾ |
ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೋರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿ | ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಟ್ಯೂಬರ್ | ಮಗದನ್ ಪ್ರದೇಶ, ಪಿಒಎಸ್. ಟೆಂಟ್, ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಟ್ಯೂಬರ್ |
ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಫುಲ್ವಮ್ | ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆ | ಮಾಸ್ಕೋ ಪ್ರದೇಶ, ದೊಡ್ಡ ಹಣ್ಣಿನ ಟೊಮೆಟೊ |
ಆಲ್ಟರ್ನೇರಿಯಾ ಟೊಮೆಟೊಫಿಲಾ | ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣು | ಆಲ್-ರಷ್ಯನ್ ರಿಸರ್ಚ್ ಇನ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟ್ ಆಫ್ ಪ್ಲಾಂಟ್ ಪ್ರೊಟೆಕ್ಷನ್ನ ಮೈಕಾಲಜಿ ಮತ್ತು ಫೈಟೊಪಾಥಾಲಜಿಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಸಿಬ್ಬಂದಿ ಹಸ್ತಾಂತರಿಸಿದರು |
ಫ್ಯುಸಾರಿಯಮ್ ವರ್ಟಿಸಿಲಿಯಮ್, ಫೋಮೋಪ್ಸಿಸ್ಫಾಸಿಯೋಲಿ, ಆಲ್ಟರ್ನೇರಿಯಾ ಆಲ್ಟರ್ನೇಟಾ, ಫೆಲಿನಸ್ ಫೆರುಜಿನೋವೆಲುಟಿನಸ್, ಸ್ಟೆಂಫಿಲಿಯಮ್ ವೆಸಿಕೇರಿಯಮ್, ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯೊಯಿಡ್ಸ್, ಆಕ್ರೊಡಾಂಟಿಯಮ್ ಲುಜುಲೇ, ಪೆನಿಸಿಲಿಯಮ್ ಎಸ್ಪಿ. | ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣು | ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರಾಂತ್ಯ, ಕ್ರಿಮ್ಸ್ಕಿ ಜಿಲ್ಲೆ, ಗ್ರೇಡ್ ಕ್ರೀಮ್ |
ಫ್ಯುಸಾರಿಯಮ್ ಆಕ್ಸಿಸ್ಪೊರಮ್ | ಗೋಧಿ ಮೂಲ | ಮಾಸ್ಕೋ ಪ್ರದೇಶ |
ಪಿಸಿಆರ್ ಅನ್ನು ಡಿಟಿಪ್ರೈಮ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಯರ್ (ಡಿಎನ್ಎ-ಟೆಕ್ನಾಲಜಿ) ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪಿಸಿಆರ್ಗಾಗಿ, ಮೂಲ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ ಜೀನ್ನ ಜಾತಿ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರದೇಶದ ತನಿಖೆಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು: ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಪ್ರೈಮರ್ Coc70gdf –TCATGATATCATTTCTCTCACGGCA, ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ Coc280gdr - TACTTGAGCATGTAGGCCTGGGT1). ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು 213 ಬಿಪಿ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ವರ್ಧಿಸುತ್ತವೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಒಟ್ಟು ಡಿಎನ್ಎಯ 50 ಎನ್ಜಿ (ಎಲೆಗಳು ಮತ್ತು ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ) ಮತ್ತು 10 ಎನ್ಜಿ (ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ಡಿಎನ್ಎ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ) ತೆಗೆದುಕೊಂಡಿತು. ಕ್ರಿಯೆಯ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು (35 μl) ಪ್ಯಾರಾಫಿನ್ ಪದರದಿಂದ ಎರಡು ಭಾಗಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ: ಕೆಳಭಾಗವು (20 μl) 2 × ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಫರ್ನ 10 μl ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ (750 ಎಂಎಂ ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್ಸಿಎಲ್, ಪಿಹೆಚ್ 8.8; 200 ಎಂಎಂ (ಎನ್ಎಚ್ 4) 2 ಎಸ್ಒ 4; 25 ಎಂಎಂ ಎಮ್ಜಿಎಲ್ 2; 0.1% ಟ್ವೀನ್-. 20), ಪ್ರತಿ ಡಿಯೋಕ್ಸಿನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ನ 0.5 ಎಂಎಂ, ಪ್ರತಿ ಪ್ರೈಮರ್ನ 7 ಪಿಎಂಒಎಲ್, ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೊಲೈಜಬಲ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಬ್ನ 4 ಪಿಎಮ್ಒಎಲ್; ಮೇಲಿನವು 1 ×l 10 × ಪಿಸಿಆರ್ ಬಫರ್ ಮತ್ತು 1 ಯು ಟಾಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.
ಪ್ಯಾರಾಫಿನ್ನೊಂದಿಗೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದರಿಂದ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು 5 ° C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಮತ್ತು 10 ° C ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 80 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬಿಸಿ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಪಿಸಿಆರ್ಗೆ ಬಿಸಿ ಪ್ರಾರಂಭವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಕೆಳಗಿನ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮದ ಪ್ರಕಾರ ಪಿಸಿಆರ್ ಅನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು: 94.0 ° C - 90 ಸೆ (1 ಚಕ್ರ); 94.0 ° C - 30 ಸೆ; 64.0 ° C - 15 ಸೆ (5 ಚಕ್ರಗಳು); 94.0 ° C - 10 ಸೆ; 64.0 ° C - 15 ಸೆ (45 ಚಕ್ರಗಳು); 10.0 ° C - ಸಂಗ್ರಹಣೆ.
ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಚರ್ಚೆ
ರಷ್ಯಾದ ವಿವಿಧ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಎಲೆಗಳು, ಕಾಂಡಗಳು, ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳು ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣುಗಳಿಂದ (ಕುಟುಜೋವಾ, 45) ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲ್ಪಟ್ಟ 2018 ತಳಿಗಳಲ್ಲಿ ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ ಜೀನ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಎಲ್ಲಾ ತಳಿಗಳ ಅಧ್ಯಯನ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಎರಡು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳಲ್ಲಿ ಭಿನ್ನವಾಗಿರುವ 2 ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ. KY496634 ಮತ್ತು KY496635 ಸಂಖ್ಯೆಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಎರಡೂ ಗುಂಪುಗಳ ಪ್ರತಿನಿಧಿಗಳ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಜೆನ್ಬ್ಯಾಂಕ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಪ್ರೈಮರ್ಗಳಾದ coc70gdf, coc280gdr ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ cocgdz ಪ್ರೋಬ್ ಅನ್ನು BLAST ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಬಳಸಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕುಲದ ಜಾತಿಗಳ ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ ಜೀನ್ನ ಎಲ್ಲಾ ಅನುಕ್ರಮಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಜೆನ್ಬ್ಯಾಂಕ್ ಡೇಟಾಬೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ ಇತರ ಜೀವಿಗಳ ಮೇಲೆ.
ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ತನಿಖೆಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಏಕರೂಪದ ಇತರ ಜೀವಿಗಳ ಯಾವುದೇ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರದೇಶಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ.
ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಸಿ. ವೈವಿಧ್ಯಮಯ ಕೆಂಪು ಸ್ಕಾರ್ಲೆಟ್, ಟೇಬಲ್ 2017). ಗೆಡ್ಡೆಗಳು ಮತ್ತು ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಎಲೆಗಳಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ದೃ To ೀಕರಿಸಲು, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ತಳಿಗಳನ್ನು ಅವರಿಂದ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಯಿತು.
ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ ಅದರ ಒಟ್ಟು ವಿಷಯ 0.05 ಎನ್ಜಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರುವಾಗ ಒಂದು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಇದನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಇದು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಒಂದು ಸ್ಕ್ಲೆರೋಟಿಯಾವು ಸರಾಸರಿ 0.131 ng ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಒಂದು ಬೀಜಕವು 0.04 ng ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ (ಕಲ್ಲೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002). ಇಂಗ್ಲಿಷ್ ಗುಂಪು (ಕಲ್ಲೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002) ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಇದೇ ರೀತಿಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ (34 ng ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಮಿತಿ ಚಕ್ರ 0.05 ಮತ್ತು 37 ng ನಲ್ಲಿ 0.005).
ಎಲ್ಲಾ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಮಾದರಿಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಅದರ ಅಸ್ತಿತ್ವವನ್ನು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗಿ ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸಿತು (ಕೋಷ್ಟಕ 2). ನೈಸರ್ಗಿಕ ಸಸ್ಯ ಮಾದರಿಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಉದ್ದೇಶಿತ ವಿಧಾನವೂ ಅನ್ವಯವಾಯಿತು.
ಕೋಷ್ಟಕ 2. ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪಿಸಿಆರ್ಗಾಗಿ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಉದ್ದೇಶಿತ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ನಿರ್ಣಯ
ಒಬಾಮಾ | ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರಮಾಣ *, ಎನ್ಜಿ | ಮಿತಿ ಚಕ್ರ | ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಪತ್ತೆ |
---|---|---|---|
ಕವಕಜಾಲ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳು | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
ಟ್ಯೂಬರ್ ಸಿಪ್ಪೆ 1 | 50 | 32 | + |
ಟ್ಯೂಬರ್ ಸಿಪ್ಪೆ 2 | 50 | 30 | + |
ಟ್ಯೂಬರ್ ಸಿಪ್ಪೆ 3 | 50 | 31.5 | + |
ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಎಲೆ | 50 | 29.5 | + |
ಸೂಚನೆ. * ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ.
15 ಜಾತಿಯ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಮಾದರಿಗಳ ಮೇಲೆ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು. ಪೀಡಿತ ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕರ ಹಣ್ಣುಗಳು ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊ, ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ಎಲೆಗಳಿಂದ ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳ ಎಲ್ಲಾ ತಳಿಗಳನ್ನು ಲೇಖಕರು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದ್ದಾರೆ; ಒಂದು ಒತ್ತಡವನ್ನು ಗೋಧಿ ಮೂಲದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಯಿತು (ಕೋಷ್ಟಕ 1). ಹಣ್ಣಿನ ಮೇಲ್ಮೈಯಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲ್ಪಟ್ಟವರಲ್ಲಿ, ಟೊಮೆಟೊಕ್ಕೆ ರೋಗಕಾರಕವಲ್ಲದ ಪ್ರಭೇದಗಳಿವೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಫೆಲಿನಸ್ ಫೆರುಜಿನೋವೆಲುಟಿನಸ್).
ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ 20–27ರ ಮಿತಿ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ, ಆದರೆ ಇತರ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ಪ್ರಭೇದಗಳು ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ ಅಥವಾ 40 ನೇ ಚಕ್ರದ ನಂತರ ಸಂಕೇತವನ್ನು ನೀಡಿವೆ, ಇದಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಶಬ್ದ ಪರಿಣಾಮ (ಟೇಬಲ್ 3) ಕಾರಣವೆಂದು ಹೇಳಬಹುದು.
ಕೋಷ್ಟಕ 3. ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಅಣಬೆಗಳಿಗಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ
ಅಣಬೆ ಹೆಸರು | ಮಿತಿ ಚಕ್ರ |
ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳು 1 | 20.9 |
ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು 2 | 22.6 |
ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು 3 | 23 |
ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು 4 | 22 |
ಫ್ಯುಸಾರಿಯಮ್ ಆಕ್ಸಿಸ್ಪೊರಮ್ | > 40 |
ಎಫ್. ವರ್ಟಿಸಿಲಿಯಮ್ | > 40 |
ರೈಜೋಕ್ಟೊನಿಯಾ ಸೋಲಾನಿ | > 40 |
ಫೋಮೋಪ್ಸಿಸ್ ಫಾಸೋಲಿ | > 40 |
ಆಲ್ಟರ್ನೇರಿಯಾ ಆಲ್ಟರ್ನೇಟಾ | > 40 |
ಎ. ಟೊಮೆಟೊಫಿಲಾ | > 40 |
ಹೆಲ್ಮಿಂಥೋಸ್ಪೋರಿಯಮ್ ಸೋಲಾನಿ | > 40 |
ಫೆಲಿನಸ್ ಫೆರುಜಿನೋವೆಲುಟಿನಸ್ | > 40 |
ಸ್ಟೆಂಫಿಲಿಯಮ್ ವೆಸಿಕೇರಿಯಂ | > 40 |
ಇಲಿಯೊನೆಕ್ಟ್ರಿಯಾ ಕ್ರಾಸ್ಸಾ | > 40 |
ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯಮ್ ಕ್ಲಾಡೋಸ್ಪೊರಿಯೊಯಿಡ್ಸ್ | > 40 |
ಸಿ. ಫುಲ್ವಮ್ | > 40 |
ಆಕ್ರೊಡಾಂಟಿಯಮ್ ಲುಜುಲೇ | > 40 |
ಪೆನ್ಸಿಲಿಯಂ ಎಸ್ಪಿ. | > 40 |
ಸೂಚನೆ. * ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರಮಾಣ 10 ಎನ್ಜಿ.
ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಹೊಂದಿದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ನೆಕ್ರೋಟ್ರೋಫಿಕ್ ರೋಗಕಾರಕಗಳು ಮತ್ತು ಬೀಜ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳು ಗೋಚರ ಲಕ್ಷಣಗಳಿಲ್ಲದೆ ಗುರುತಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ, ನಾವು ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ, ಮಾಸ್ಕೋ, ಕಲುಗಾ, ನಿಜ್ನಿ ನವ್ಗೊರೊಡ್ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆದ ವಿವಿಧ ಪ್ರಭೇದಗಳ ಬೀಜ ಗೆಡ್ಡೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ. ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಮಹತ್ವದ್ದಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅದರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಮಿತಿ ಚಕ್ರ 35 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿಲ್ಲ. 0.05 ಎನ್ಜಿ ಸಿ. 33.5 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಿತಿ ಚಕ್ರಗಳಲ್ಲಿ, ಕೆಲವು ಇತರ ಶಿಲೀಂಧ್ರ ಪ್ರಭೇದಗಳ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಡಿಎನ್ಎ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಈ ವಿಧಾನದಿಂದ, ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ, ಮಾಸ್ಕೋ, ಕಲುಗಾ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆದ 2 ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರದೇಶದ ಯೀಸ್ಕ್ ಜಿಲ್ಲೆಯಿಂದ ಒಂದು ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಯಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಗಮನಾರ್ಹ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು (ಕೋಷ್ಟಕಗಳು 40, 5).
ಕೋಷ್ಟಕ 4. ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ಮೇಲೆ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ಪತ್ತೆ *
ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆ | ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ವಿವಿಧ | ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸ್ಥಳ | ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಪತ್ತೆ | ಮಿತಿ ಚಕ್ರ |
---|---|---|---|---|
1 | ಕೆಂಪು ಸ್ಕಾರ್ಲೆಟ್ | ಕೊಸ್ಟ್ರೋಮಾ ಪ್ರದೇಶ | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | ಸಾಂಟೆ | ಮಾಸ್ಕೋ ಪ್ರದೇಶ | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | ಜುಕೊವ್ಸ್ಕಿ ಆರಂಭಿಕ | ಮಾಸ್ಕೋ ಪ್ರದೇಶ | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | ಮೊಲ್ಲಿ | ಕಲುಗ ಪ್ರದೇಶ | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | ಫ್ಯಾಂಟಸಿ | ಕಲುಗ ಪ್ರದೇಶ | - | |
15 | ಗಾಲಾ | ನಿಜ್ನಿ ನವ್ಗೊರೊಡ್ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ. | - | |
16 | - |
ಸೂಚನೆ. * ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರಮಾಣ 50 ಎನ್ಜಿ.
ಕೋಷ್ಟಕ 5. ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಗಳ ಮೇಲೆ ಕೊಲೆಟೊಟ್ರಿಚಮ್ ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ಪತ್ತೆ *
ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆ | ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸ್ಥಳ | ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಪತ್ತೆ | ಮಿತಿ ಚಕ್ರ |
---|---|---|---|
1 | ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರಾಂತ್ಯ, ಕ್ರಿಮಿಯನ್ ಜಿಲ್ಲೆ | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರಾಂತ್ಯ, ಯೀಸ್ಕ್ ಜಿಲ್ಲೆ | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರಮಾಣ 50 ಎನ್ಜಿ.
ನಮ್ಮಿಂದ ರಚಿಸಲಾದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಬ್ರಿಟಿಷ್ ಸಂಶೋಧಕರು (ಕಲ್ಲೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002) ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯಲ್ಲಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದಕ್ಕಿಂತ ಕೆಳಮಟ್ಟದಲ್ಲಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಸಸ್ಯ ಮಾದರಿಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಬೀಜದ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಅದರ ಅನ್ವಯವು ಬಾಹ್ಯ ಹಾನಿಯ ಚಿಹ್ನೆಗಳಿಲ್ಲದೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಎಲೆಗಳ ಸೋಂಕನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸಿತು.
ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ಮುತ್ತಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಗೆ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ರಷ್ಯಾದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ನಮ್ಮ ಮೊದಲ ಅಧ್ಯಯನವು ರಷ್ಯಾದ ಒಕ್ಕೂಟದ ವಿವಿಧ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆದ 16 ಪರೀಕ್ಷಿತ ಬೀಜ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ 5 ರಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳಿವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಗೆಡ್ಡೆಗಳ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆ ರಷ್ಯಾದಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಕಾಯಿಲೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಬೆಳೆಯ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ಇದರ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಟೊಮೆಟೊ ಎಲೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಪ್ರದೇಶದ ಯೀಸ್ಕ್ ಜಿಲ್ಲೆಯಿಂದ ಒಂದು ಎಲೆಯಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎಯ ಗಮನಾರ್ಹ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿತು. ಮುಂಚಿನ, ದಕ್ಷಿಣ ರಷ್ಯಾದಲ್ಲಿ ಟೊಮೆಟೊ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳನ್ನು ಬ್ರಿಟಿಷ್ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು (ಕಲ್ಲೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದಾಗ, ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎಲೆಗಳು ಕಂಡುಬಂದವು, ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳಿಂದ ಸೋಂಕಿತ ಎಲೆಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣವು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ (ಬೆಲೋವ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2018). ಮಾಸ್ಕೋ ಪ್ರದೇಶದ ಕ್ರಾಸ್ನೋಡರ್ ಮತ್ತು ಪ್ರಿಮೊರ್ಸ್ಕಿ ಪ್ರಾಂತ್ಯಗಳಲ್ಲಿ, ನಾವು ಟೊಮೆಟೊ ಹಣ್ಣುಗಳನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡೆವು, ಇದರಿಂದ ನಾವು ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ಶುದ್ಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳು ರಷ್ಯಾದಲ್ಲಿ ಟೊಮೆಟೊದಲ್ಲಿ ಈಗ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ನಂಬುವುದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಹರಡಿರುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಹಾನಿಕಾರಕತೆಯನ್ನು ಸಹ ಕಡಿಮೆ ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಹೀಗಾಗಿ, ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಆಲೂಗಡ್ಡೆ ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊಗಳ ಮೇಲೆ ಸಿ. ಕೋಕೋಡ್ಗಳ ವ್ಯಾಪಕ ವಿತರಣೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಸಾಕಷ್ಟು ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಆಲೂಗೆಡ್ಡೆ ಮತ್ತು ಟೊಮೆಟೊ ಕಾಯಿಲೆಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯಲ್ಲಿ ಈ ಶಿಲೀಂಧ್ರದ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು, ರಷ್ಯಾದಲ್ಲಿ ಇದರ ಹರಡುವಿಕೆಯನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡುವುದು, ಮಣ್ಣು ಮತ್ತು ಬೀಜದ ಸೋಂಕುಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು ಮತ್ತು ಶೇಖರಣಾ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ನಷ್ಟದಲ್ಲಿ ಕಪ್ಪು ಚುಕ್ಕೆಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು ಅವಶ್ಯಕ. ಪಿಸಿಆರ್ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ಸ್ ಬಳಕೆಯು ಈ ಕೆಲಸವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಸುಗಮಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎರಡೂ ಪರೀಕ್ಷಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಏಕಕಾಲಿಕ ಬಳಕೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಈ ಕೆಲಸವನ್ನು ರಷ್ಯನ್ ಸೈನ್ಸ್ ಫೌಂಡೇಶನ್ ಅನುದಾನ ಸಂಖ್ಯೆ 18-76-00009 ಬೆಂಬಲಿಸಿದೆ.
ಲೇಖನವನ್ನು "ಮೈಕಾಲಜಿ ಮತ್ತು ಫೈಟೊಪಾಥಾಲಜಿ" (ಸಂಪುಟ 54, ಸಂಖ್ಯೆ 1, 2020) ಜರ್ನಲ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗಿದೆ.